Головна сторінка

Какое напряжение можно рекомендовать для разных типов буфера?



НазваКакое напряжение можно рекомендовать для разных типов буфера?
Дата конвертації18.03.2016
Розмір40.2 Kb.
ТипАнализ

Анализ cитуаций, возникающих при работе, показывает, что проблемы касаются в основном характеристик буфера, установки рабочего напряжения источника питания, способов нанесения пробы, то есть круг их не так широк. Мы постарались обобщить их и ответить на наиболее часто повторяющиеся вопросы.
Какое напряжение можно рекомендовать для разных типов буфера?

При использовании веронал-мединаловых буферов оптимальным будет напряжение 220-230 Вольт. Для гиппуратного буфера напряжение необходимо снизить до 180 Вольт. При этом удовлетворительной длины разгонки можно достичь за 35 минут.
Почему длина разгонки слишком короткая (15-20 мм), а уход от места нанесения пробы небольшой? Фракции просматриваются четко, с явно выраженным разделением. При обработке разделение на фракции некачественное.

Низкое напряжение, либо малое время электрофореза.
Уход от места нанесения пробы хороший, но длина разгонки короткая (10-15 мм). Время электрофореза рекомендованное методиками. Фракции просматриваются четко, с явно выраженным разделением. При обработке разделение на фракции некачественное.

Высокое напряжение электрофореза
Почему на альбуминовой фракции присутствует белое пятно?

Это передозировка сывороткой. Наносится слишком много пробы и краска не в состоянии прокрасить весь объем. Причиной является засоренная или помятая щель аппликатора. Можно посоветовать промыть дозирующие элементы гипохлоридом и выпрямить лезвием бритвы помятые скобы. Зачастую это бывает при применении бромфенолового красителя (он более критичен к передозировке) и достаточно лишь сменить его на Пунцовый-С
Почему ацетат-целлюлозная пленка пересыхает в средней части и анализ пропадает?

Причин может быть две. Первая - неправильно приготовленный буфер. Вторая - неисправный источник питания. Убедиться, какая из причин можно таким образом: посмотреть во время разгонки напряжение. Если оно равно установленному (или ниже) - блок питания исправен и проблема в буфере. Иногда такое случается, если в камеру поместить неотжатую пленку. Если же напряжение выше 350-400 Вольт, скорее всего вышел из строя блок питания и нужно обратитьс Анализ cитуаций, возникающих при работе, показывает, что проблемы касаются в основном характеристик буфера, установки рабочего напряжения источника питания, способов нанесения пробы, то есть круг их не так широк. Мы постарались обобщить их и ответить на наиболее часто повторяющиеся вопросы.
Какое напряжение можно рекомендовать для разных типов буфера?

При использовании веронал-мединаловых буферов оптимальным будет напряжение 220-230 Вольт. Для гиппуратного буфера напряжение необходимо снизить до 180 Вольт. При этом удовлетворительной длины разгонки можно достичь за 35 минут.
Почему длина разгонки слишком короткая (15-20 мм), а уход от места нанесения пробы небольшой? Фракции просматриваются четко, с явно выраженным разделением. При обработке разделение на фракции некачественное.

Низкое напряжение, либо малое время электрофореза.
Уход от места нанесения пробы хороший, но длина разгонки короткая (10-15 мм). Время электрофореза рекомендованное методиками. Фракции просматриваются четко, с явно выраженным разделением. При обработке разделение на фракции некачественное.

Высокое напряжение электрофореза
Почему на альбуминовой фракции присутствует белое пятно?

Это передозировка сывороткой. Наносится слишком много пробы и краска не в состоянии прокрасить весь объем. Причиной является засоренная или помятая щель аппликатора. Можно посоветовать промыть дозирующие элементы гипохлоридом и выпрямить лезвием бритвы помятые скобы. Зачастую это бывает при применении бромфенолового красителя (он более критичен к передозировке) и достаточно лишь сменить его на Пунцовый-С
Почему ацетат-целлюлозная пленка пересыхает в средней части и анализ пропадает?

Причин может быть две. Первая - неправильно приготовленный буфер. Вторая - неисправный источник питания. Убедиться, какая из причин можно таким образом: посмотреть во время разгонки напряжение. Если оно равно установленному (или ниже) - блок питания исправен и проблема в буфере. Иногда такое случается, если в камеру поместить неотжатую пленку. Если же напряжение выше 350-400 Вольт, скорее всего вышел из строя блок питания и нужно обратиться на предприятие-изготовитель по телефонам: (3472) 50-16-19, 51-42-08, 74-42-83, ООО НПЦ "АСТРА" или написать письмо на astra@bashnet.ru.
Почему на источнике питания напряжение высвечивается ниже установленного?

Прибор переходит в режим ограничения тока. В этом случае ток не превышает установленный порог и снижается напряжение. Проверить можно, посмотрев текущее значение тока. Если оно равно установленному (в нормальной ситуации оно меньше и зависит от количества мостиков в камере), то напряжение будет снижаться. Причина кроется скорее всего в неправильно приготовленном буфере, либо неправильно установлен ток ограничения (ориентировочно он равен 30-35 мА).
Чему должен быть равен текущий ток во время электрофореза?

Ток будет зависеть, в основном от количества мостиков в камере, от выставленного напряжения и от применяемого буфера (остальные факторы влияют в меньшей мере). С гиппуратным буфером и напряжении 180 Вольт с одним мостиком ток будет равен 2-4 мА (два мостика 4-8 мА, три соответственно 6-12 Ма). Для веронал-мединаловых буферов значения несколько выше и для одного мостика будет равен 5-7 мА.я на предприятие-изготовитель.
Почему на источнике питания напряжение высвечивается ниже установленного?

Прибор переходит в режим ограничения тока. В этом случае ток не превышает установленный порог и снижается напряжение. Проверить можно, посмотрев текущее значение тока. Если оно равно установленному (в нормальной ситуации оно меньше и зависит от количества мостиков в камере), то напряжение будет снижаться. Причина кроется скорее всего в неправильно приготовленном буфере, либо неправильно установлен ток ограничения (ориентировочно он равен 30-35 мА).
Чему должен быть равен текущий ток во время электрофореза?

Ток будет зависеть, в основном от количества мостиков в камере, от выставленного напряжения и от применяемого буфера (остальные факторы влияют в меньшей мере). С гиппуратным буфером и напряжении 180 Вольт с одним мостиком ток будет равен 2-4 мА (два мостика 4-8 мА, три соответственно 6-12 Ма). Для веронал-мединаловых буферов значения несколько выше и для одного мостика будет равен 5-7 мА.